CO-IP 工作液的配制Preparation 贮液：Washing buffer: ①1M Tris-Cl ,pH 7.6 (100ml): Tris-base 12.11g, add ddH2O to 100ml, using HCl to adjust the pH t留磁珠沉淀4⃣️ 向每个离心管中加入1ug/ul-10ug/ul的1ml细胞裂解液蛋白，4°C 孵育6 h 或过夜，用磁力架去上清，留磁珠沉淀5⃣️ 加入500 μL 1×PBS 4°C 轻柔旋转清洗磁珠洗3 次，
可与该固定蛋白相互作用的配体蛋白被吸附，而没有被吸附的“杂质”则随洗脱液流出。被吸附的蛋白可以通12.放入研钵，用液氮研磨样品。13.向研钵中加入提取缓冲液(见配方，2% PVPP+10mM DTT+1×PI+1mM PMSF),每克组织加约2mL提取缓冲液，放入4℃冰箱，等到粉末开始融化，并通过研磨使混合
10、C缓慢摇晃孵育2-4h,使抗体与proteinA琼脂糖珠偶连；免疫沉淀反应后，在4C以3,000rpm速度离心3min,将琼脂糖珠离心至管底；将上清小心吸去，琼脂糖珠用1ml裂解缓冲液洗34次；最后加入1(5)洗脱液，25 mL,pH 2.0(如需自己配见附录2) (6)电泳上样缓冲液：非还原性，5×), 5 mL,pH 6.8,0.3M Tris·HCl,5% SDS,50% 甘油，泳道标记示踪染料(好像不含巯基乙醇，减少IP抗
?﹏? 抗体洗脱液配方二0.2M 氢氧化钠抗体洗脱液用法：a.加入适量蒸馏水装有NC膜或PVDF膜的抗体孵育盒中，漂洗5min(液体量能没过膜即可) b.弃掉蒸馏水加入适量抗体洗脱液，摇床上漂洗5min4. 溶液配方#T10007 CoIP洗脱液(A,B液) 5ml 1. 产品介绍本产品为即用型CoIP实验中使用的洗脱溶液，包括A液(洗脱液)和B液(中和溶液). 2. 产品使用流程该产品用于从在溶液中
洗脱液---将目的蛋白从固相介质上洗脱下来，依据捕获方式和下游应用优化配方如果诱饵蛋白或者靶蛋白带有标签，可用高浓度标签或配体进行竞争洗脱温和的配方：0.1M 甘氨酸(pH2.5-3) 苯甲基磺酰氟(PMSF)(用异丙醇配制成200 mM 的储存液，室温保存) EDTA(钙螯合剂；用H2O配制成100 mM 的储存液，PH 7.4) 亮抑酶肽(Leupeptin)(用H2O配制成1 mg/ml 的储存液，分装，20℃
