●△● 有报道称miRNA通过结合其靶标以Ago2依赖性方式抑制翻译并降解mRNA。随后作者在过表达miR-619-5p的细胞中使用Ago2抗体进行了抗Ago2 RNA免疫沉淀(RIP)发现PVT1的量显着增加。结论:PVRIP(RNA免疫共沉淀)属于后者,利用特异性的抗体捕获样本中的目标蛋白,那么与目标蛋白结合的RNA也一并被捕获,之后通过qPCR或者测序技术来确定这些结合的RNA
●0● ago2 rip实验原理go2 rip实验原理RIP 实验基本原理:1. 用抗体或表位标记物捕获细胞核内或细胞质中内源性的RNA结合蛋白。2. 防止非特异性的RNA的结合。3. 免疫沉淀把RNA结二、RIP/ago2-RIP实验:RIP(RNA 免疫共沉淀)技术主要研究蛋白与RNA的相互作用。利用HuR抗体从小鼠细胞和人细胞裂解液中钓取与HuR蛋白结合的RNA,产物进行qrt-PCR检测,结果表明Lnc-MD
RIP全称RNA Binding Protein Immunoprecipitation,RNA结合蛋白免疫共沉淀。顾名思义,说的就是RNA结合蛋白与RNA之间的研究。研究发现miRNA有一个共同结合的蛋白,AGO-2蛋白。RIP全称RNA Binding Protein Immunoprecipitation,RNA结合蛋白免疫共沉淀。顾名思义,说的就是RNA结合蛋白与RNA之间的研究。研究发现miRNA有一个共同结合的蛋白,AGO-2蛋白。因此在
在最近的一项研究中,我们使用一种Ago2特异性抗体来定义野生型和Dicer-/-小鼠胚胎干细胞中的microRNA结合位点,从而识别出不同的microRNA依赖和不依赖的Ago2结合位点。HITS-CLIP成功G、RIP实验,用ago2抗体钓取与ago2蛋白结合的RNA,q-pcr检测产物,表明LncCCAT1能结合miR-7-ago2复合体。H、检测LncCCAT1过表达、miR-7转染细胞中的HOXB13表达,表明miR-7下调HOXB13
在AGO2 RIP实验中,关键的步骤包括选择适当的抗体、免疫复合物的形成、沉淀条件的优化以及洗涤和RNA提取的严格控制,以确保实验结果的可靠性和准确性。此外,合理摘要:目的探讨DSCR8在影响胃癌进程中的分子机制。方法IncBase数据库和Targetscan预测了DSCR8和miR-107之间的关系,并通过双荧光素酶和RIP实验验证了这一关系。FISH检测DSCR8