CoIP的原理图,如下所示:文献中Co-IP的实验截图:先看一下图中的缩写:IP全称是immunoprecipitation,即免疫沉淀,这一步主要是为了纯化目的蛋白。IB全称是immunoblotting,即免疫印选做:A.向细胞裂解液上清中加入1.0μg IgG(与IP及COIP实验一抗种属来源相同的普通IgG)和20μL A/G-珠子(使用前充分混匀),4℃摇转孵育30min;然后使用BCA法测定蛋
1、ip实验与coip实验区别
三、实验流程为:(1)转染后24-48 h 可收获细胞,加入适量细胞裂解缓冲液(含蛋白酶抑制剂),冰上裂解30min, 细胞裂解液于4°C,最大转速离心30 min后取上清;(2)取免疫共沉淀(Co-IP)是利用抗原与抗体之间的专一性作用为基础,用于研究蛋白质与蛋白质之间相互作用的经典方法。相较于其他分子间相互作用检测方法(GST pull down 等),免疫共沉淀实验的
2、co ip实验步骤
由图中可以得到,蛋白EDR4带有GDP标签,蛋白EDR1带有FLAG标签,该实验为利用蛋白标签来沉淀和检测蛋白;该co-ip实验实验被分为两组,第一组存在GFP标签及EDR1-FLAG蛋白,第二组存在EDR4-GIP:immunoprecipitation免疫沉淀IB:immunoblotting 免疫印迹,就是WB Input:用于IP反应的原始样品,用来估计IP反应中目标蛋白的含量SENCR shRNA即处理条件,、表示加没加这个条件
3、co-ip实验
免疫共沉淀(Co-IP)是利用抗原与抗体之间的专一性作用为基础,用于研究蛋白质与蛋白质之间相互作用的经典方法。相较于其他分子间相互作用检测方法(GST pull down IP:immunoprecipitation 免疫沉淀(纯化目的蛋白)IB:immunoblotting 免疫印迹,即Western Blotting(显示目的蛋白) huarenqiang5 2022-11-04 有帮助IP是加入抗体后的所吸附的蛋白的实
4、coip实验视频
抗体选择:用于COIP实验的抗体必须是IP级别的抗体,所以选购抗体时一定要看清楚该抗体能否用于IP实验。如下图为ABCAM中某个抗体的应用范围及使用量说明,选购时需注意。涉及吸取珠coip实验步骤coip实验详解一实验材料详见westernblot实验详解二实验原理免疫共沉淀coip是一种在体外探测两个蛋白分子间是否存在特异性相互作用的一种方法CO-IP实验详解一、