免疫沉淀是基于传统亲和纯化方法开发的，在含有目的抗原的细胞裂解液中加入特定的抗体以及Protein A-Beads (预先将Protein A固定结合在磁珠上), 根据抗原与抗体、Protein A与抗体的FC的特异性，形成下面先介绍一下实验流程及原理。建议IP或者CO-IP之前，熟练WB的技术流程和原理，这样就很容易理解其中的原理啦。第一天：1.提蛋白：10cm的皿细胞长满，每皿根据细胞沉淀大小加IP裂解液
c) 对于某些难溶解蛋白的WB,如果WB/IP裂解液(# MP1504-100ML)效果不理想，可尝试使用裂解强度更高的裂解液如RIPA(强，中)或SDS裂解液。d) 对于特定用途需要自行添加特定抑制剂或不需从细胞水平来看，IP裂解液的作用主要是通过两个过程实现的：脂质溶解和脂质破坏。首先，IP裂解液中的表面活性剂与细胞膜上的脂质分子相互作用，使脂质分子从细胞膜上溶解出来。这
免疫沉淀(IP)是利用固定在磁珠或琼脂糖树脂等固相支持物上的特异性抗体对抗原进行小型亲和纯化的方法。需要从细胞或组织裂解物中分离用于免疫印迹检测或其他检测技术的蛋白和其他生RIPA裂解液(Radio Immunoprecipitation Assay Lysis buffer,放射免疫沉淀法裂解缓冲液)是一种传统的可用于裂解细胞或组织的快速裂解液，其原理为利用表面活性剂等裂解细胞膜(
以下使用方法中提到的IP裂解液均指已添加蛋白酶抑制剂。对于组织样品：1. 组织块用预冷PBS(推荐G4202)洗涤，去除血污，剪成细小碎块置于匀浆器中。2. 加入10倍组织体积IP裂解液低温匀浆(推荐Servi1.裂解缓冲液能有效地增溶细胞蛋白，但不释放基因组DNA或破坏蛋白质复合物。2.此裂解液能有效兼容许多应用，包括pull-down,Elisa,免疫沉淀，免疫共沉淀，免疫印迹，报告分析，蛋
以下使用方法中提到的IP裂解液均指已添加蛋白酶抑制剂。对于组织样品：1. 组织块用预冷PBS(推荐G4202)洗涤，去除血污，剪成细小碎块置于匀浆器中。2. 加入10倍组织体积IP裂解液低温匀浆(推荐Servi01细胞裂解样本的制备细胞裂解样本制备是免疫沉淀实验的第一步，拥有合适的裂解缓冲液对制备高质量的免疫沉淀样品至关重要。关键点——IP/Co-IP裂解液应能从样品中获得足量的蛋白质
