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ip磁珠加多少,磁珠的参数

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2.加入20 μL洗脱缓冲液和5 μL 5×SDS-PAGE样品缓冲液,用吸管轻轻吹吸令免疫磁珠复合物重悬。3.在95-100℃下加热5-10分钟。4.将试管置于磁性分离器上,收集上清液用于进一3.磁珠清洗:取进口1.5EP,每个样品加20μl,加IP裂解液清洗(多少的磁珠用多少的裂解液),涡旋,放在磁力架上计时2min,用枪头弃液体,重复3次。这一步可以在实验间隙提前进行)。4.去除

免疫共沉淀分析(Co-IP)与IP十分相似,实验的方案和基本流程与IP相同,当制备好亲和微球-抗体-抗原复合物后,可以加入待测样品混合孵育,基本上所有IP的体系均可以2⃣️48h后或者72h后,用NP40裂解3⃣️取两组每组分别3个1.5 mL离心管分别加入50μL 颠倒混匀的proteinA+G磁珠(如图2),加入500μL 1×PBS 4°C 轻柔旋转(用图6的旋转仪,放在层析柜

1. 孵育磁珠:在对应管中加入相应抗体,IgG(IgG切记不要加太多),如果质粒上带有flag或者HA标签,可以用anti-flag/ha磁珠直接拉蛋白(每个样品用20~30ul的beads),4℃旋转孵育过夜或者室1) 磁珠洗涤:2个1.5 mL EP管中分别加入30 µL磁珠,PBS + 0.5%Triton洗涤磁珠,磁力架磁性分离,共洗3次;2) 磁珠重悬:400 µL PBS + 0.5%Triton重悬磁珠;3) 包

使用磁珠进行免疫沉淀(即,当样品体积< 2 mL)。在日常小型分离特定蛋白质和蛋白复合物时,磁珠可实现结合能力/得率、可重复性、纯度和成本节约之间的平衡。当进行手动和自动化标准IP、Co-IP、ChIP、2.磁珠大小:280 nm或1μm;结合力:20-25nmol核酸或蛋白/mg。大于0.5mg蛋白/ml磁珠;3.适用实验:分离纯化、IP、CO-IP、RNA pull down等;4.保存:2-8℃,室温运输

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