在做CoIP实验过程中往往会遇到目的蛋白与抗体轻链(25kDa左右)或者抗体重链(55kDa左右)的分子量接近的情况，导致IP-WB检测时无法判断目的蛋白条带(如上图)。如何解决这种问题，困扰了由于加样缓冲液中含有巯基乙醇，巯基乙醇会把抗体的重链和轻链之间的二硫键破坏，从而使的抗体变成重链分
细胞株和裂解液多重miRNA检测多因子分析试剂盒按研究领域癌症心血管细胞生物学表观遗传学代谢发育生物学按研究领域免疫学微生物学神经科学信号转导干细胞定制化在IP实验过程中，很容易产生IgG重链轻链的干扰，严重影响对结果的判断。那么，要想知道怎么样减少这些干扰呢，首先要理解这些干扰是怎么产生的。下图是IP复合物（IP Complex）的结构
由于加样缓冲液中含有巯基乙醇，巯基乙醇会把抗体的重链和轻链之间的二硫键破坏，从而使的抗体变成重链分子55KD和轻链分子25KD,因此会在结果中呈现两个条带。ip后wb时本身就要煮沸变性，这对轻重链有什么影响呢m0m0 Elute是酸洗脱，只会洗脱蛋白，不会洗脱ip抗体。然后再去煮沸变性。这不就避免了重轻链吗赞回应王
≥▂≤ 选择同一种源的抗体的问题在于：在WB之前进行的蛋白变性这一步，由于加样缓冲液中含有巯基乙醇，巯基乙醇会把抗体的重链和轻链之间的二硫键破坏，从而使的抗体变成重链分子55KD和轻链分子25KD。假设你答：用兔的lgG 做对照；用抗Fab 和Fc 抗体特异性封闭轻链和重链；在WB 二抗上着手，这种二抗针对的是轻重链间的二硫键，若跑SDS 胶，最后显影是检测不到重链和轻链的. 8. 免
如果遇到免疫共沉淀后期WB重链和轻链干扰的问题，可以选择上面的方法。pull down #免疫沉淀#免疫共沉淀#CoIP#GST#免疫印记#蛋白质互作2022-12-09 共10+ 条评(co-Immunoprecipitation, co-IP) 实验中，常常因为有限的一抗，IP和WB的操作过程中而不得不用到相同的一抗或同种属来源的一抗，这种情况下，如果使用常规的Anti-
