以Nature上发表的一项新冠病毒蛋白互作组学研究中的部分蛋白质组定量数据为例，提取其中病毒N蛋白相关的IP实验组和对照组数据，以相同的定量筛选标准筛选互作蛋白时(log2 Fold change>IP 实验原理免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)原理IP 是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的“protein A/G"特异性地结合到抗体(免疫球蛋白)的FC 片段的现
IP 实验步骤基本实验步骤(1)收获细胞，加入适量细胞IP 裂解缓冲液(含蛋白酶抑制剂),冰上或者4?裂解30min, 12,000g 离心30 min 后取上清；(2) 取少量裂解下面，给大家来一次蛋白实验的盛宴：揭秘蛋白互作的全过程，IP和Co-IP究竟是一个怎样的神奇操作？一、免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP) “免疫沉淀”一般是指采
因此在细胞裂解液中加入X的抗体沉淀蛋白X,随后利用蛋白印迹(western blot,WB)检测沉淀中是否存在蛋白Y,如果存在，则说明细胞内存在XY蛋白复合物，即蛋白XY存在相互作用。Co-IPAbbkine解决方案：产生此问题的重点在于实验中目的蛋白的信号模糊，无法进行判断，那就需要在根本上将干扰的信号降到最低，而IPKine系列二抗经过特别设计和优化，可以和重/轻链特异性结合
●▽● 理想的裂解液可以保留蛋白质的天然构象，将抗体结合位点变性减到最少，同时从样本中释放足够量的蛋白，以满足实验需求。常规IP实验通常可用RIPA做裂解液；对于Co-IP实验，则建议优先尝免疫沉淀实验成功与否，第一步处理样品非常关键！免疫沉淀实验本质上是处于天然构象状态的抗原和抗体之间的反应，而样品处理的质量决定了抗原抗体反应中的抗原的质量，浓度以及抗原是
(#｀′)凸 免疫沉淀(IP)是利用固定在磁珠或琼脂糖树脂等固相支持物上的特异性抗体对抗原进行小型亲和纯化的方法。需要从细胞或组织裂解物中分离用于免疫印迹检测或其他检测技术的蛋白和其他生IP：全称immunoprecipitation，即免疫沉淀，这一步主要是为了纯化富集目的蛋白。Input：全细胞裂解液，含有细胞内所有的蛋白，可认为是阳性组。也就是处理完样本得到的细胞裂解液
