Co-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析法的原理是利用抗原-抗体相互作用拉下靶蛋白的方式推定相互作用的蛋白。具体而言，将目标蛋白的抗体固定在亲和树脂中，然后将其暴Tris-HCl(缓冲液成分，防止蛋白变性) NaCl(盐份，防止非特异蛋白聚集) NP-40(非离子去污剂，提取蛋白；用H2O配制成10%储存液) 去氧胆酸钠(离子去污剂，提取蛋白；用H2O配制成10%储
coip蛋白提取后需要立即跑wb吗
简介：免疫(共)沉淀(IP/CoIP)是基于抗体和蛋白的特异性亲和作用，通过捕获与蛋白或抗原特异性结合的抗体，进而从复杂的样品中捕获及富集目标蛋白，同时可以测定与常被用于验证已知的两个蛋白质是否存在相互作用。实验流程实验步骤1.细胞蛋白提取1.1 细胞培养(贴壁细胞：100mm细胞培养皿中单层细胞长满80%-90%或者细胞培养瓶中细胞达到
做coip的蛋白浓度
1) 总蛋白提取：① 细胞样品准备：3000rpm离心5min收集细胞，PBS漂洗，加入适量modified RIPA Buffer(含蛋白酶抑制剂),冰上裂解30min,然后于4℃,12000rpm离心20mi免疫共沉淀的特点可以概括为两点，第一是天然状态，第二是蛋白复合物。RIPA Buffer配制基础成分：Tris-HCl(缓冲液成分，防止蛋白变性) NaCl(盐份，防止非特异蛋
ripa提取蛋白的原理
加入适量(材料：提取液=1:1.5)蛋白提取缓冲液，冰上孵育30min;蛋白提取缓冲液：试剂用量Tris-MES(0.5M,pH=8.0)10mLEDTA(0.5M,pH8.0)2mLSucrose17.115(1M)0.1mLDTT说明蛋白X、蛋白Y不能与IgG结合(阴性对照，用于排除蛋白与抗体非特异性结合的可能性);IP组的第二条带表示利用蛋白X进行沉淀实验，结果蛋白X被沉淀下来，蛋白Y也被沉淀下来，由此得到结
