IP:全称immunoprecipitation,即免疫沉淀,这一步主要是为了纯化富集目的蛋白。Input:全细胞裂解液,含有细胞内所有的蛋白,可认为是阳性组。也就是处理完样本得到的细胞裂解液总述:免疫沉淀(IP)是一种利用抗原与抗体的亲和力,从溶液中特异性分离抗原的方法。常常借助此技术来分离纯化目的蛋白。纯化后的蛋白可以利用SDS-PAGE、western-blot等实验方法来进一
IP:immunoprecipitation免疫沉淀IB:immunoblotting 免疫印迹,就是WB Input:用于IP反应的原始样品,用来估计IP反应中目标蛋白的含量SENCR shRNA即处理条件,、表示加没加这个条件input是阳性对照。免疫共沉淀实验中,会直接取细胞裂解液进行WB,用于验证细胞裂解液中确实存在目的蛋白,即阳性对照。如何避免重链,轻链的影响(点击此链接详述)? 设计合适的IP实验;
Co-IP(co-Immunoprecipitation),免疫共沉淀原理:Co-IP是一种常用的鉴定蛋白-蛋白相互作用的方法,其基本实验流程和IP类似,通过使用诱饵蛋白(IP中的抗原,bait protein)特异性抗体间接捕获与其结合Co-IP:利用抗原抗体反应的特异性;GST Pull down:一般指用一个带GST标签的重组蛋白,与目的蛋白进行孵育,最后用结合GST的Beads拉下相互作用复合物。3.免疫共沉淀中的input是指什么
 ̄□ ̄|| IP就是免疫共沉淀Immunoprecipitation的缩写啊。。input就是没有做pull down,直接把样品整个加进去。就EIP:即指免疫沉淀(immunoprecipitation),用相应的抗体来纯化富集目的蛋白,例如图中“IP: Flag”的意思是用Flag标签抗体磁珠去拉Flag,与Flag融合表达的蛋白为诱饵蛋白,此时与