一、IP/ Co-IP重轻链干扰怎么来的？IP实验分成两个部分(免疫沉淀IP+WB)。免疫沉淀部分：在含A蛋白细胞裂解液中加入A蛋白抗体(IP抗体),再加入琼脂糖珠/磁珠，形成“A蛋白+IP抗体+磁珠可能会出现抗体lgG重链（55kD）和轻链（25kD）与后续二抗发生交叉反应，这一情况也只出现在IP抗体与
断裂为组成抗体的轻重链，此时若IP抗体种属与WB抗体种属来源相同，就会被常规Anti-IgG(H+L)(H+L表示使用的免疫原就是抗体轻重链Heavy chain+Light chain)酶标二抗识别，显影时就出现了(co-Immunoprecipitation, co-IP) 实验中，常常因为有限的一抗，IP和WB的操作过程中而不得不用到相同的一抗或同种属来源的一抗，这种情况下，如果使用常规的Anti-IgG(H+L)酶标二抗，WB
∪０∪ 一个免疫球蛋白分子包含四个肽链，俩相同的短链叫做轻链（L链），俩相同的长链叫做重链（H链），链链之间通过二硫键相连，俩链各有一个恒定部分一个变异部分，从而由于加样缓冲液中含有巯基乙醇，巯基乙醇会把抗体的重链和轻链间的二硫键破坏，从而使抗体变成重链分子55KD和轻链分子25KD, 如果目的蛋白在55KD或25KD附近，则IP抗体的重链或轻链和
要想减少IgG重链轻链对实验结果判断的干扰，首先要理解这些干扰是如何产生的：Fig 1. IP复合物（IP Complex）的结构由图1可以看出，免疫沉淀复合物由三部分组成：ProteinA(G)凝胶IP二抗- 没有重轻链干扰利用免疫共沉淀(co-IP) 识别和分离与靶蛋白结合的生理相关蛋白，并在完成co-IP 步骤后，在没有一抗重链和轻链的干扰下揭示蛋白间的相互作用。完成c
IPKine是一系列新型的二抗产品，能有效解决IP-WB后的轻/重链干扰问题。IPKine系列二抗经过特别优化，不会与IgG的轻/重链分子结合，只识别IgG分子的重/轻链部分，从而能有效解选择两个不同种源的抗体在实验中，IP的抗体用量较大，会导致抗体重链55kd的信号会很强。如果用单一种源的抗体作为二抗进行显色，那么抗体重链55kd处的IP抗体的重链会干扰我们对目
